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    葉綠素測定儀的試驗
    點擊次數:887 發布時間:2018-04-28
    葉綠素測定儀是托普儀器研發的用來測量葉綠素含量的專用儀器,通常市面上面主要是TYS-A型。TYS-A葉綠素測定儀測量時間快速,LCD直接顯示葉綠素值,30個數據,自動計算并顯示平均值。

    實驗準備
    (一)材料:新鮮(或烘干)的植物葉片。
    (二)儀器設備:1. 分光光度計;2. 電子ding載天平(感量0.01g);3. 研缽;4. 棕色容量瓶;5. 小漏斗;6. 定量濾紙;7. 吸水紙;8. 擦境紙;9. 滴管。
    (三)試劑:96%乙醇(或80%丙酮);石英砂;碳酸鈣粉。
    實驗步驟
    1. 取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),混勻。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml,繼續研磨至組織變白。靜置3~5min。3. 取濾紙1張,置漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,過濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次,后連同殘渣一起倒入漏斗中。4. 用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。后用乙醇定容至25ml,搖勻。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內。以95%乙醇為空白,在波長665nm、649nm下測定吸光度。
    四、實驗結果計算:將測定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),二者之和為總葉綠素的濃度。后根據下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:
    葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數]/樣品鮮重(或干重)。
     
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